在臨床,Elisa是一種常用于檢測(cè)生物樣本中特定蛋白質(zhì)、肽、細(xì)胞因子或其他分子的免疫學(xué)技術(shù)。Elisa檢測(cè)方法有很多種,可以根據(jù)檢測(cè)目標(biāo)分子的大小、性質(zhì)以及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的需求來選擇合適的類型。以下是一些常見的Elisa檢測(cè)方法。
1、直接Elisa:也稱為一步法Elisa,用于檢測(cè)樣本中存在的目標(biāo)抗原。在該方法中,抗原直接與固相酶標(biāo)記抗體結(jié)合,然后通過添加底物進(jìn)行顯色反應(yīng),從而檢測(cè)目標(biāo)抗原的存在。
2、間接Elisa:也稱為兩步法Elisa,用于檢測(cè)樣本中的目標(biāo)抗體。首先,將抗原包被在微孔板上,然后添加待測(cè)樣本,如果樣本中含有針對(duì)該抗原的抗體,將與之結(jié)合。之后,可以添加酶標(biāo)記的二抗,與樣本中的抗體結(jié)合,最后通過添加底物進(jìn)行顯色反應(yīng)。
3、雙抗原Elisa:該方法結(jié)合了直接和間接Elisa的原理,用于檢測(cè)樣本中的特定抗體和抗原。首先,將抗原A包被在微孔板上,然后添加樣本。如果樣本中含有抗體,會(huì)與抗原A結(jié)合。之后,可以添加抗原B,如果樣本中有特定的抗體,會(huì)再次與之結(jié)合。最后,添加酶標(biāo)記的二抗,與樣本中的抗體結(jié)合,通過添加底物進(jìn)行顯色反應(yīng)。
4、競(jìng)爭(zhēng)Elisa:用于檢測(cè)樣本中的特定抗原或抗體。在該方法中,將酶標(biāo)記的目標(biāo)分子與未標(biāo)記的目標(biāo)分子競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合到固相抗體上。通過比較酶標(biāo)記目標(biāo)分子與未標(biāo)記目標(biāo)分子的結(jié)合情況,可以評(píng)估樣本中的目標(biāo)分子濃度。
5、捕獲Elisa:也稱為反向Elisa,用于檢測(cè)樣本中的特定抗體。在該方法中,將未標(biāo)記的抗原包被在微孔板上,然后添加酶標(biāo)記的二抗。如果樣本中含有針對(duì)該抗原的抗體,會(huì)與酶標(biāo)記的二抗結(jié)合。之后,可以添加底物進(jìn)行顯色反應(yīng),從而檢測(cè)樣本中的抗體。
上述只是Elisa檢測(cè)方法的一部分,實(shí)際上還有許多其他類型的Elisa方法,具體可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行選擇和調(diào)整。